電子顯微鏡（EM）的工作流程涵蓋樣本制備、設(shè)備調(diào)試、成像及數(shù)據(jù)分析四個(gè)核心環(huán)節(jié)，每個(gè)環(huán)節(jié)均需精細(xì)操作以確保圖像質(zhì)量。
樣本制備是成像的基礎(chǔ)。透射電鏡（TEM）要求樣本厚度低于100納米，生物樣本需通過戊二醛固定、梯度乙醇脫水及環(huán)氧樹脂包埋，再經(jīng)超薄切片機(jī)切成納米級(jí)切片；金屬樣本則需機(jī)械研磨至微米級(jí)后，通過離子減薄或電解雙噴法進(jìn)一步減薄。掃描電鏡（SEM）樣本需保持表面形態(tài)，生物樣本需經(jīng)固定、脫水、臨界點(diǎn)干燥及噴金處理，以增強(qiáng)導(dǎo)電性。
設(shè)備調(diào)試需在開機(jī)后預(yù)熱30分鐘，待儀器穩(wěn)定后進(jìn)行。首先調(diào)整電子槍使電子束聚焦于樣本，通過光闌控制束流直徑以平衡分辨率與亮度。隨后，旋轉(zhuǎn)物鏡和目鏡調(diào)焦環(huán)進(jìn)行焦距調(diào)整，確保圖像清晰；根據(jù)樣本特性選擇合適放大倍數(shù)，避免過高導(dǎo)致失真。最后，通過調(diào)節(jié)對(duì)比度和亮度優(yōu)化圖像質(zhì)量，移動(dòng)載物臺(tái)使目標(biāo)區(qū)域位于視野中心。
高清成像階段，需根據(jù)樣本類型選擇成像模式。TEM通過電子穿透樣本形成高分辨率圖像，可觀察細(xì)胞內(nèi)部超微結(jié)構(gòu)；SEM利用二次電子信號(hào)呈現(xiàn)樣本表面形貌，適合分析材料表面特征。成像過程中，需實(shí)時(shí)監(jiān)控圖像質(zhì)量，適時(shí)調(diào)整參數(shù)。
數(shù)據(jù)分析環(huán)節(jié)，利用專業(yè)軟件對(duì)圖像進(jìn)行放大、旋轉(zhuǎn)、測(cè)量及三維重建，提取結(jié)構(gòu)參數(shù)與形態(tài)特征，為科研提供量化依據(jù)。
